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日本北海道發(fā)生赤潮，近九成海膽死亡，海膽的尸體將如何處理？

日本北海道發(fā)生赤潮，近九成海膽死亡，海膽尸體要及時(shí)打撈，及時(shí)處理，否則就會(huì)產(chǎn)生污染。

1、日本北海道發(fā)生赤潮，大部分海膽死亡，未來可能捕撈不到海膽

赤潮是一種非常可怕的現(xiàn)象，海上的蜉蝣生物迅速增長(zhǎng)，也就形成了海上赤潮現(xiàn)象，海水都變紅，或者變成了其他顏色。因?yàn)楹Ｃ嫔鲜艿搅顺喑爆F(xiàn)象的影響，所以就造成了氧氣缺乏，最直接的就是導(dǎo)致海膽死亡，其他的海產(chǎn)品死亡。據(jù)有關(guān)專家推測(cè)，因?yàn)槿毡颈焙５腊l(fā)生的這次赤潮，導(dǎo)致大部分海膽死亡，未來可能捕撈不到海膽了。海膽是一種營(yíng)養(yǎng)價(jià)值很高的海產(chǎn)品，日本人非常喜歡吃，如今卻因?yàn)槌喑睂?dǎo)致海膽大量死亡，這也是日本的一個(gè)損失。

2、要及時(shí)處理這些海膽的尸體

因?yàn)槿毡颈焙５腊l(fā)生了赤潮現(xiàn)象，所以導(dǎo)致大部分海膽出現(xiàn)了缺氧死亡的現(xiàn)象，要及時(shí)處理這些海膽的尸體。因?yàn)檫@些海膽的尸體有毒，所以要及時(shí)打撈，及時(shí)處理。避免海膽的尸體影響該海域其他的海產(chǎn)品受到污染。與這些海膽一起受影響的還有很多鮭魚，這些都是因?yàn)槌喑庇绊懺斐傻?，日本人?duì)于鮭魚的需求也很大，所以這次赤潮帶來的經(jīng)濟(jì)損失不可低估。如果未來5年內(nèi)都沒有海膽可捕撈，就會(huì)給那些美食家?guī)砗艽蟮挠绊?，他們吃不到這些美味了。

3、引起赤潮現(xiàn)象的原因

有網(wǎng)友稱，引起赤潮現(xiàn)象的原因，日本人應(yīng)該自己找，他們向大海里排泄核污染的廢物，結(jié)果導(dǎo)致大量的蜉蝣繁殖，它們的數(shù)量增多，就導(dǎo)致出現(xiàn)了赤潮現(xiàn)象。給海膽，鮭魚以及其他魚類的氧氣越來越少，最后導(dǎo)致大量海膽死亡，大量鮭魚死亡。保護(hù)環(huán)境是多么重要的事啊，千萬不能向大海里排泄污染物。

日本北海道發(fā)生赤潮，近九成海膽死亡，海膽的尸體將如何處理？

一、日本北海道發(fā)生赤潮，近九成海膽死亡，是什么情況？

日本北海道地區(qū)出現(xiàn)了非常嚴(yán)重的赤潮現(xiàn)象，作為全世界比較大的一個(gè)漁場(chǎng)，北海道地區(qū)因?yàn)檫@次赤潮損失慘重，當(dāng)?shù)氐臐O民們養(yǎng)殖的海膽有超過九，成都出現(xiàn)了死亡的現(xiàn)象，根據(jù)漁民們的說法，這些海膽用手一捏就碎了，這對(duì)于靠養(yǎng)殖海產(chǎn)品生活的漁民們來說，是巨大的經(jīng)濟(jì)損失，整個(gè)北海道地區(qū)的海域都出現(xiàn)死亡的海膽遍布沙灘的景象，當(dāng)?shù)氐臐O民們可能在以后很長(zhǎng)的一段時(shí)間之內(nèi)都沒有海產(chǎn)品可以捕撈了。

二、這些海膽的尸體將如何處理？

這些死去的海膽全部都變成了空殼，鋪滿了整個(gè)北海道地區(qū)的海灘，而這些海膽的空殼想要處理起來難度也是非常的大，所以當(dāng)?shù)氐娜藗冎荒苋斡珊Ｄ懙目諝だ^續(xù)留在海灘上，有部分漁民把這些海膽的空殼撿回去，當(dāng)作飼料來種花種草，但是絕大多數(shù)的海膽也只能在死亡之后被擱置在海灘上。

三、怎么才能避免這種現(xiàn)象的產(chǎn)生？

日本之所以這次會(huì)出現(xiàn)這么嚴(yán)重的赤潮危機(jī)，就是因?yàn)槿毡救似綍r(shí)會(huì)把一些生活污水和工業(yè)污水直接排進(jìn)海洋當(dāng)中，這勢(shì)必會(huì)給海洋的水質(zhì)帶來極大的影響，這些污水進(jìn)入到海洋之后，海水就出現(xiàn)了富營(yíng)養(yǎng)化藻類，生物就在這樣富營(yíng)養(yǎng)化的環(huán)境當(dāng)中大肆的繁殖，赤潮就這樣出現(xiàn)了，藻類會(huì)負(fù)責(zé)在海膽等等一些海產(chǎn)品的表面，這些海產(chǎn)品沒有辦法呼吸，自然就會(huì)出現(xiàn)死亡的情況，所以這是日本人自己帶給自己的一次危機(jī)。要避免這種現(xiàn)象，只能夠通過他們自己，不要再給海里排放各種有害廢水，才能夠避免這種現(xiàn)象。

海膽的尸體需要及時(shí)的進(jìn)行打撈處理，如果放任不管的話海膽尸體腐爛之后就會(huì)造成巨大的水質(zhì)污染，對(duì)北海道附近水域的生態(tài)環(huán)境造成破壞。

因?yàn)楹Ｄ懹卸?，所以最好是處理干凈，不讓任其漂在海面上，但是此次海膽死亡過多，只有少數(shù)被漁民撿回家，剩下的都還繼續(xù)漂在海上。

回感試驗(yàn)是什么

激發(fā)實(shí)驗(yàn)主要是檢查測(cè)定氣道的反應(yīng)性，是主要檢測(cè)肺功能的一項(xiàng)指標(biāo)之一。目前常用的是使用吸入激發(fā)劑，比如乙酰甲膽堿和組胺類的藥物，還有其他的一些變應(yīng)源，以及單磷酸腺苷、甘露醇、高滲的鹽水，還有一些物理激發(fā)因素，比如運(yùn)動(dòng)、吸入冷空氣等作為激發(fā)劑。通常通過使用這些激發(fā)劑進(jìn)入人體氣道之后，來明確是否出現(xiàn)有肺功能的下降，可以用于診斷支氣管哮喘以及慢阻肺等疾病，而且能夠明確其病情，及時(shí)做出相應(yīng)的治療和護(hù)理方案。

中間球海膽黑嘴病病原菌的分離與鑒定

劉巖松，張偉杰，王中，殷維駿，歐凡江，田文卓，劉雷，常亞青*

(大連海洋大學(xué) 農(nóng)業(yè)農(nóng)村部北方海水增養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，遼寧大連 116023)

摘要: 為確定中間球海膽Strongylocentrotus intermedius黑嘴病的病原，從患黑嘴病中間球海膽體腔液中分離出一株優(yōu)勢(shì)菌(記為D1)，通過人工回感試驗(yàn)確定致病性后，對(duì)該致病菌進(jìn)行電鏡觀察、革蘭氏染色、生理生化鑒定和16S rRNA序列比對(duì)以鑒定其分類地位，并測(cè)定了D1菌株對(duì)30種抗生素的敏感性。結(jié)果表明：中間球海膽經(jīng)D1菌株回感后，發(fā)病癥狀與自然狀態(tài)下患黑嘴病海膽癥狀相同，并在回感海膽體腔液中分離出相同菌株；D1菌株長(zhǎng)×寬為(2.10±0.31)μm×(0.68±0.08)μm，為革蘭氏陰性菌；16S rRNA序列比對(duì)結(jié)果顯示，D1菌株與棘皮動(dòng)物弧菌Vibrio echinoideorum的一致性高達(dá)99.04%；生化鑒定結(jié)果顯示，D1菌株與蔗糖、6% NaCl胨水和氧化酶反應(yīng)均呈陽性；根據(jù)生理生化試驗(yàn)和16S rRNA分子生物學(xué)鑒定結(jié)果，確定該病原菌為棘皮動(dòng)物弧菌；藥敏試驗(yàn)顯示，該菌株對(duì)氧氟沙星、多黏霉素B、復(fù)方新諾明、氨芐西林和羧芐西林等16種抗菌藥物敏感，對(duì)麥迪霉素、慶大霉素等11種抗菌藥物耐藥。研究表明，中間球海膽黑嘴病的病原菌為棘皮動(dòng)物弧菌，且該菌株對(duì)部分抗菌藥物不敏感，具有一定的耐藥性。

關(guān)鍵詞: 中間球海膽；黑嘴?。徊≡b定

中間球海膽Strongylocentrotus intermedius作為一種優(yōu)質(zhì)海膽種類，具有生長(zhǎng)速度快及生殖腺色澤光亮、質(zhì)地飽滿和味甜等特點(diǎn)。中間球海膽原產(chǎn)于日本北方沿海和俄羅斯遠(yuǎn)東部分地區(qū)沿海，中國(guó)自1989年從日本引入該種后，便對(duì)其開展了生物學(xué)、生態(tài)學(xué)、人工育苗及遺傳育種等一系列研究[1-2]，同時(shí)開始進(jìn)行人工增養(yǎng)殖生產(chǎn)。目前，中間球海膽已成為中國(guó)重要的海珍品增養(yǎng)殖種類之一[2]。近年來，海膽逐漸被中國(guó)消費(fèi)者認(rèn)可，其養(yǎng)殖規(guī)模不斷擴(kuò)大，但細(xì)菌性疾病如黑嘴病[3]、紅斑病[4-5]和病變綜合征等[6]也開始在養(yǎng)殖生產(chǎn)中頻繁暴發(fā)，嚴(yán)重制約了海膽?zhàn)B殖業(yè)的健康發(fā)展。

黑嘴病是中間球海膽?zhàn)B殖過程中危害最嚴(yán)重的疾病之一。春夏交替時(shí)的低溫期是黑嘴病頻繁暴發(fā)的高峰期，且黑嘴病病原菌對(duì)受損傷海膽致病性較強(qiáng)[7]，患病海膽的主要特征是圍口膜顏色發(fā)黑，隨著病情逐漸加重，其不能正常進(jìn)行附著和攝食活動(dòng)，棘逐漸脫落直至死亡[3]。黑嘴病傳染性強(qiáng)，死亡率高，在中間球海膽?zhàn)B殖過程中危害較大，因此，開展黑嘴病病原的分離和鑒定及病原菌病原特性的研究，對(duì)有效防控中間球海膽黑嘴病具有重要意義。目前，已有研究對(duì)中間球海膽黑嘴病致病菌的鑒定尚有爭(zhēng)議。Takeuchi等[8]從患黑嘴病中間球海膽中分離出一種菌株，根據(jù)病原菌的生化特性、DNA-DNA同源性和血清學(xué)分析，證明該病原菌為弧菌屬Vibrio；而李太武等[3]根據(jù)該病原菌的形態(tài)特征及生化特性，鑒定中間球海膽黑嘴病的病原菌為堅(jiān)強(qiáng)芽孢桿菌Bacillus firmus。原因可能是黑嘴病的病原菌有多種，導(dǎo)致分離出的致病菌種類不一，也可能是因?yàn)樵囼?yàn)方法及鑒定方法不同，導(dǎo)致結(jié)果出現(xiàn)分歧。鑒于目前細(xì)菌鑒定技術(shù)的不斷進(jìn)步，有必要對(duì)黑嘴病病原菌進(jìn)行重新鑒定。本研究中，對(duì)患有黑嘴病的中間球海膽進(jìn)行了病原菌分離純化，并采用電鏡觀察、革蘭氏染色、生理生化鑒定和16S rRNA序列比對(duì)等系列手段對(duì)該病原進(jìn)行了鑒定，以期為海膽黑嘴病的防治提供科學(xué)參考。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗(yàn)用患病及健康中間球海膽均取自大連海洋大學(xué)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部北方海水增養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室同批人工繁育群體，挑選具有典型黑嘴病病癥的個(gè)體作為病原分離的試驗(yàn)材料。

抗菌藥物藥敏紙片購自杭州微生物試劑有限公司；細(xì)菌微量鑒定管購自海博生物技術(shù)有限公司；2216E培養(yǎng)基、無菌接種環(huán)和PBS試劑均購自生工生物工程(上海)股份有限公司。

1.2 方法

1.2.1 病原菌的分離與純化在無菌條件下，對(duì)具有典型黑嘴病病癥的中間球海膽進(jìn)行解剖，吸取其體腔液于2216E固體培養(yǎng)基上進(jìn)行劃線分離，在16 ℃下恒溫培養(yǎng)12 h后，對(duì)菌落形態(tài)、大小和顏色等進(jìn)行觀察比較，挑取優(yōu)勢(shì)菌落進(jìn)行純化培養(yǎng)，將菌液與體積分?jǐn)?shù)為80%的甘油按體積比1∶1混合均勻后置于-80 ℃下保存?zhèn)溆?，分離的細(xì)菌編號(hào)為D1。

1.2.2 人工回感試驗(yàn) 采用浸泡法進(jìn)行人工回歸感染試驗(yàn)，隨機(jī)取200只健康無病癥的中間球海膽，等分放入4個(gè)10 L滅菌水槽中，暫養(yǎng)3 d后開始試驗(yàn)，使用1 mL無菌注射器針頭從海膽圍口膜處刺入造成損傷后，向水槽中加入10 μL濃度為108 cfu/mL的D1菌液，最終浸泡脅迫濃度為 102 cfu/mL，對(duì)照組僅使用針頭損傷海膽，養(yǎng)殖于無菌海水中。試驗(yàn)期間保持水溫為(17±1)℃，連續(xù)觀察7 d并記錄試驗(yàn)海膽的發(fā)病癥狀及死亡情況。

1.2.3 病原菌形態(tài)觀察將純化后的病原菌涂布在載玻片上，經(jīng)火焰固定，隨后分別加結(jié)晶紫染液1 min后水洗、碘液1 min后水洗、脫色液1 min后水洗及復(fù)染液30 min后水洗，晾干后進(jìn)行鏡檢。

取10 mL濃度為109 cfu/mL的D1菌液離心(3 000 g)，去除上清液，加入5 mL 0.1 mol/L PBS清洗，清洗3次后加入5 mL體積分?jǐn)?shù)為2.5%的戊二醛固定3 h，用PBS清洗2次，用純水清洗2次，再用體積分?jǐn)?shù)為30%、50%、70%、80%、90%和100%的乙醇溶液梯度脫水，最后滴加處理好的樣品于1 cm×1 cm的貝殼上，置于烘箱中進(jìn)行烘干，樣品充分干燥后進(jìn)行掃描電鏡觀察。

1.2.4 病原菌生化特征鑒定將分離株D1接種于2216E固體培養(yǎng)基上，在16 ℃下恒溫培養(yǎng)24 h，用無菌接種環(huán)挑取適量單菌落接種于細(xì)菌微量鑒定管中，用無菌封口膜封口，在37 ℃下恒溫培養(yǎng)。

1.2.5 病原菌分子生物學(xué)鑒定將新鮮培養(yǎng)的單菌落挑取至2216E液體培養(yǎng)基中，于16 ℃下恒溫培養(yǎng)12 h后，取1 μL稀釋5倍作為模板。利用通用引物(引物序列為8F：AGAGTTTGATCCTGGCTCAG，1492R：GGTTACCTTGTTACGACTT)擴(kuò)增16S rRNA基因全長(zhǎng)。反應(yīng)體系(共50 μL)：正、反向引物各2 μL，DNA模板1 μL，rTaq 0.4 μL，dNTP Mixture 4 μL，10×PCR Buffer 5 μL，用無菌水補(bǔ)足至50 μL。反應(yīng)條件：94 ℃下預(yù)變性5 min；94 ℃下變性30 s，43.6 ℃下退火30 s，72 ℃下延伸1 min，共進(jìn)行35個(gè)循環(huán)；最后再在72 ℃下延伸10 min。將所得未純化PCR產(chǎn)物送至生工生物工程(上海)股份有限公司測(cè)序。運(yùn)用MEGA X軟件將返回的D1菌株16S rRNA基因擴(kuò)增序列進(jìn)行拼接，得到全長(zhǎng)后在Ezbio Cloud數(shù)據(jù)庫中進(jìn)行多序列比對(duì)。將EzBio Cloud數(shù)據(jù)庫中與D1菌株的16S rRNA基因序列相似度較高的幾種常見致病弧菌，用MEGA X軟件進(jìn)行比對(duì)，并采用鄰接法(NJ)構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹, 以自舉數(shù)據(jù)集為1 000次的自舉分析(bootstrap)進(jìn)行置信度檢測(cè)。

1.2.6 藥敏試驗(yàn) 對(duì)病原菌D1運(yùn)用藥敏紙片擴(kuò)散法進(jìn)行藥敏試驗(yàn)。取200 μL新鮮菌液涂布于2216E固體培養(yǎng)基上，將藥敏紙片用無菌鑷子貼于涂布新鮮菌液的培養(yǎng)基表面，在16 ℃下恒溫培養(yǎng)24 h，根據(jù)杭州微生物試劑有限公司提供的《藥敏試驗(yàn)紙片法的抑菌范圍解釋標(biāo)準(zhǔn)》，通過測(cè)定抑菌圈直徑確定病原菌株的藥物敏感性。

2 結(jié)果與分析

2.1 病原菌分離純化

從圖1可見，從患病中間球海膽中提取的優(yōu)勢(shì)病原菌D1在2216E培養(yǎng)基上培養(yǎng)12 h(16 ℃)后，菌落呈圓形、乳白色、不透明。

2.2 人工回感試驗(yàn)

人工回感試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，海膽在感染48 h內(nèi)出現(xiàn)圍口膜變黑，管足回縮，附著能力喪失，運(yùn)動(dòng)能力減弱等病癥(圖2)，與自然發(fā)病的海膽癥狀相同。從表1可見：感染后的海膽在48 h后開始出現(xiàn)死亡，第8天時(shí)3組的平均死亡率為30.67%±1.15%；對(duì)照組海膽損傷后置入無菌海水中暫養(yǎng)，并未發(fā)生病狀。同時(shí)，再次從人工感染的發(fā)病海膽中進(jìn)行優(yōu)勢(shì)菌分離，用二次分離到的菌株感染健康海膽，出現(xiàn)的海膽黑嘴病癥狀與自然發(fā)病癥狀相同，16S rRNA序列比對(duì)結(jié)果均與菌株D1一致。這表明，菌株D1為中間球海膽黑嘴病病原。

你好，針對(duì)于你的問題回感試驗(yàn)其實(shí)就是利用組織切片及免疫組化技術(shù)對(duì)感染動(dòng)物的的肝臟、脾臟、腎臟及其他組織進(jìn)行了組織病理切片,并進(jìn)行HE染色和免疫組化分析的一種實(shí)驗(yàn)方法。

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稻蟹綜合種養(yǎng)新模式試驗(yàn)

張姐講人情

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稻蟹綜合種養(yǎng)新模式試驗(yàn)

_李小進(jìn)等

蟹綜合種養(yǎng)在遼寧省稻漁綜合種養(yǎng)中占據(jù)重要地位，是遼寧省漁業(yè)優(yōu)勢(shì)產(chǎn)業(yè)。根據(jù)遼寧省漁業(yè)統(tǒng)計(jì)年報(bào)，2020年遼寧省稻漁綜合養(yǎng)殖面積100萬畝，河蟹產(chǎn)量5.5萬t。為保障糧食安全和促進(jìn)農(nóng)業(yè)增收，貫徹農(nóng)業(yè)農(nóng)村部等十部委《關(guān)于加快推進(jìn)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)綠色發(fā)展的若干意見》，遼寧省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳制定了《遼寧省加快推進(jìn)稻漁綜合種養(yǎng)發(fā)展指導(dǎo)意見》，每年拿出專項(xiàng)資金支持產(chǎn)業(yè)推進(jìn)，計(jì)劃到“十四五”末，遼寧省稻漁綜合種養(yǎng)面積發(fā)展到150萬畝。為保證這個(gè)目標(biāo)實(shí)現(xiàn)，團(tuán)隊(duì)針對(duì)遼寧省稻蟹綜合種養(yǎng)比較效益不高的問題開展探索研究，尋找適用本地的方法，助推遼寧省稻漁綜合種養(yǎng)業(yè)發(fā)展。

一、技術(shù)路線

本試驗(yàn)在水稻不減產(chǎn)的情況下，以增加河蟹收益來提高稻田的綜合收益。試驗(yàn)采用稻田成蟹扣蟹混養(yǎng)模式，稻田面積100畝，其中80畝養(yǎng)成蟹，20畝養(yǎng)扣蟹。扣蟹養(yǎng)殖選擇優(yōu)質(zhì)蟹苗“光合1號(hào)”，成蟹采用80%母蟹+20%公蟹模式，以提高稻蟹養(yǎng)殖的經(jīng)濟(jì)效益。常規(guī)模式是稻田養(yǎng)殖成蟹，母蟹和公蟹各占一半。新模式相對(duì)常規(guī)模式，增加的收益一部分來自扣蟹高于成蟹產(chǎn)量的價(jià)值，另一部分來自于母蟹高于公蟹售價(jià)的價(jià)值。

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