一、植物組織培養(yǎng)過程中具體消毒操作過程和技術(shù)？
組培過程消毒一般就分材料去清洗、酒精處理、升汞處理（或是次氯酸鈉處理）
主要看你的材料，材料很嫩很嫩的，且木質(zhì)化程度低的話一般酒精處理階段會(huì)省去。
清洗一般就洗潔精洗凈表層灰塵，清水沖洗個(gè)把小時(shí)
之后就是在操作臺上操作了，酒精處理階段看材料木質(zhì)化程度確定時(shí)間，一般就10-60S，處理好后及時(shí)用無菌水清洗，3-5次，
升汞處理的話一般是6-15m，也是看材料啦，比較干凈的材料相對時(shí)間短一點(diǎn)，期間要一直震蕩，處理好后無菌水清洗5-6次，OK了！酒精濃度75%，升汞0.1%，次氯酸鈉一般5%和10%都可以。
二、克隆羊多莉的原理及主要環(huán)節(jié)
在培育多利羊的過程中，科學(xué)家采用了體細(xì)胞克隆技術(shù)。也就是說，從一只成年綿羊身上提取體細(xì)胞，然后把這個(gè)體細(xì)胞的細(xì)胞核注入另一只綿羊的卵細(xì)胞之中，而這個(gè)卵細(xì)胞已經(jīng)抽去了細(xì)胞核，最終新合成的卵細(xì)胞在第三只綿羊的子宮內(nèi)發(fā)育形成了多利羊。從理論上而言，多利繼承了提供體細(xì)胞的那只綿羊的遺傳特征。培育多利羊的技術(shù)，已經(jīng)成為如今培育體細(xì)胞克隆動(dòng)物的標(biāo)準(zhǔn)過程。
從芬蘭多塞特母綿羊的乳腺中取出乳腺細(xì)胞，將其放入低濃度的營養(yǎng)培養(yǎng)液中，細(xì)胞逐漸停止了分裂，此細(xì)胞稱之為供體細(xì)胞；給一頭蘇格蘭黑面母綿羊注射促性腺素，促使它排卵，取出未受精的卵細(xì)胞，并立即將其細(xì)胞核除去，留下一個(gè)無核的卵細(xì)胞，此細(xì)胞稱之為受體細(xì)胞；利用電脈沖的方法，使供體細(xì)胞和受體細(xì)胞發(fā)生融合，最后形成了融合細(xì)胞，由于電脈沖還可以產(chǎn)生類似于自然受精過程中的一系列反應(yīng)，使融合細(xì)胞也能象受精卵一樣進(jìn)行細(xì)胞分裂、分化，從而形成胚胎細(xì)胞；將胚胎細(xì)胞轉(zhuǎn)移到另一只蘇格蘭黑面母綿羊的子宮內(nèi)，胚胎細(xì)胞進(jìn)一步分化和發(fā)育，最后形成一只小綿羊。出生的“多莉”小綿羊與多塞特母綿羊具有完全相同的外貌。
從理論上講，多莉繼承了提供體細(xì)胞的那只芬蘭多塞特母綿羊的遺傳特征，它是一只白臉羊，而不是黑臉羊。分子生物學(xué)的測定也表明，它與提供細(xì)胞核的那頭羊，有完全相同的遺傳物質(zhì)（確切地說，是完全相同的細(xì)胞核遺傳物質(zhì)。還有極少量的遺傳物質(zhì)存在于細(xì)胞質(zhì)的線粒體中，遺傳自提供卵母細(xì)胞的受體），它們就像是一對隔了6年的雙胞胎。
三、硫酸銨分級沉淀蛋白質(zhì)的原理和方法是什么?。?/h2>
原理就是溶液中的離子強(qiáng)度不同時(shí)，不同蛋白質(zhì)的溶解度不同，步驟就是不斷加硫酸銨…以血漿為例：加到鹽濃度20~30%時(shí)纖維蛋白原沉淀，再加到濃度50%時(shí)球蛋白沉淀，飽和時(shí)清蛋白沉淀…一，基本原理硫酸銨沉淀法可用于從大量粗制劑中濃縮和部分純化蛋白質(zhì)。用此方法可以將主要的免疫球從樣品中分離，是免疫球蛋白分離的常用方法。高濃度的鹽離子在蛋白質(zhì)溶液中可與蛋白質(zhì)競爭水分子，從而破壞蛋白質(zhì)表面的水化膜，降低其溶解度，使之從溶液中沉淀出來。各種蛋白質(zhì)的溶解度不同，因而可利用不同濃度的鹽溶液來沉淀不同的蛋白質(zhì)。這種方法稱之為鹽析。鹽濃度通常用飽和度來表示。硫酸銨因其溶解度大，溫度系數(shù)小和不易使蛋白質(zhì)變性而應(yīng)用最廣。二，試劑及儀器1.組織培養(yǎng)上清液、血清樣品或腹水等2.硫酸銨（NH4）SO43.飽和硫酸銨溶液（SAS）4.蒸餾水5.PBS(含0.2g/L疊氮鈉)6.透析袋7.超速離心機(jī)8.pH計(jì)9.磁力攪拌器三，操作步驟以腹水或組織培養(yǎng)上清液為例來介紹抗體的硫酸銨沉淀。各種不同的免疫球蛋白鹽析所需硫酸銨的飽和度也不完全相同。通常用來分離抗體的硫酸銨飽和度為33%—50%。（一）配制飽和硫酸銨溶液（SAS）1.將767g（NH4）2SO4邊攪拌邊慢慢加到1升蒸餾水中。用氨水或硫酸調(diào)到硫酸pH7.0。此即飽和度為100%的硫酸銨溶液（4.1mol/L,25°C）.2.其它不同飽和度銨溶液的配制（二）沉淀1.樣品（如腹水）20000′g離心30min，除去細(xì)胞碎片；2.保留上清液并測量體積；3.邊攪拌邊慢慢加入等體積的SAS到上清液中，終濃度為1：1（4.將溶液放在磁力攪拌器上攪拌6小時(shí)或攪拌過夜（4°C），使蛋白質(zhì)充分沉淀。（三）透析1.蛋白質(zhì)溶液10000′g離心30min（4°C）。棄上清保留沉淀；2.將沉淀溶于少量（10-20ml）PBS-0.2g/L疊氮鈉中。沉淀溶解后放入透析袋對PBS-0.2g/L疊氮鈉透析24-48小時(shí)（4°C），每隔3-6小時(shí)換透析緩沖液一次，以徹底除去硫酸氨；3.透析液離心，測定上清液中蛋白質(zhì)含量。四，應(yīng)用提示（一）先用較低濃度的硫酸氨預(yù)沉淀，除去樣品中的雜蛋白。1.邊攪拌邊慢慢加SAS到樣品溶液中，使?jié)舛葹?.5:1(v/v)；2.將溶液放在磁力攪拌器上攪拌6小時(shí)或過夜（4°C）；3.3000′g離心30min（4°C），保留上清液；上清液再加SAS到0.5:1(v/v)，再次離心得到沉淀。將沉淀溶于PBS，同前透析，除去硫酸氨；4.上清液再加SAS到0.5:1(v/v)，再次離心得到沉淀。將沉淀溶于PBS，同前透析，除去硫酸氨；5.雜蛋白與欲純化蛋白在硫酸氨溶液中溶解度差別很大時(shí)，用預(yù)沉淀除雜蛋白是非常有效（二）為避免體積過大，可用固體硫酸氨進(jìn)行鹽析（硫酸氨用量參考表1）；硫酸氨沉淀法與層析技術(shù)結(jié)合使用，可得到更進(jìn)一步純化的抗體。